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缺氧實驗(二)

一、目的要求

1.學習復制動物缺氧病理模型的方法,掌握不同缺氧類型主要的發病原因和機制。

2.觀察不同類型缺氧時呼吸、皮膚粘膜顏色、活動以及氧分壓的改變。

3.了解機體功能、代謝特點與缺氧對機體影響的關系。

二、實驗動物

1.體重相近的小白鼠6只。

2.新生幼鼠1只。

三、實驗項目、步驟與觀察指標

一、年齡因素對缺氧耐受性的影響

1.取新生幼鼠1只,放入青霉素小瓶內(瓶口塞以少量棉花以免成年鼠傷害),然后將其與成年鼠一起放入廣口瓶內,觀察動物一般狀況。

2.密閉瓶塞,記錄時間,觀察兩鼠狀況。

3.記錄兩鼠死亡時間。注意,當其中一只小鼠死亡后,不能揭開瓶蓋;如另一鼠至各項實驗結束時仍未死亡,實驗也應中止。

思考不同年齡動物對缺氧耐受性不同的原因。

二、低張性缺氧實驗

1.用天平稱重小鼠,取體重相近的2只小白鼠(體重相差<1g),分別投入鈉石灰瓶(A)和玻璃珠瓶(B)內,在觀察它們一般的活動狀況后,同時密閉兩只玻璃瓶,并開始計時。觀察過程中必須經常注意瓶子的密閉性。

觀察要點:兩鼠在瓶內的活動度、呼吸、皮膚粘膜的顏色等變化,每3分鐘記錄一次,在其中一只小鼠死亡時,記錄死亡時間,并做下步驟操作。

2.立即用5ml注射器同時地從連接兩只瓶子的乳膠管部位分別抽取約2ml氣體,在注意固定注射針與注射器連接部位的情況下拔出注射針,并立即將注射針插入軟木塞使抽取的氣體與外界空氣隔絕。經測氧儀測定A、B瓶內當時的氧分壓。在持續保存兩瓶密封的條件下繼續觀察另一未死亡小鼠的活動情況。在該鼠死亡時立即記錄死亡時間,并同上述要求再次抽取A、B兩瓶內的氣體,測量氧分壓。

比較A、B兩只小鼠在不同密閉空間內存活時間的差別,以及與兩鼠各自死亡時它們周圍氣中O2量消耗的差異,分析不同小鼠在密閉空間內機體功能變化特點與對缺氧耐受性的關系,討論發生不同變化的原因與機制。

3.尸檢。當兩小鼠都死亡后,取其中1只小白鼠,打開胸腔,觀察內臟顏色并與以下各項實驗后小鼠尸檢作比較。

開胸后,剪破心臟,用吸管滴入27%檸檬酸鈉溶液,迅速混勻,取出2,滴入盛有5ml蒸餾水的試管內,立即用軟木塞蓋緊,搖勻,觀察試管內溶液的顏色,并與以下各項實驗后制備的同種溶液作比較。

注:以下每個實驗都有尸檢這一步,以便比較不同原因所致缺氧時血液顏色的差異。所以,每次取血都應該盡量做到操作的“標準化”,如加入檸檬酸鈉溶液的量和吸取抗凝血液的量(2滴,滴管口徑粗細不同,2滴血液量多少可明顯有差異)等。另外,放入血液的蒸餾水試管應立即用軟木塞蓋緊。想一想這是為什么?

三、一氧化碳中毒

1.取1只小白鼠觀察其正常時的活動、腹式呼吸的頻率等。

2.將其放入燒瓶內,瓶內放入通入家用煤氣的裝置,通入煤氣的玻璃管插入盛水的試管內,以試管內水中放出的氣泡數調節通氣量,氣泡產生速度控制在10個/min左右,通氣速度過快,可使小鼠所在三角量燒瓶內的CO濃度迅速增高,導致動物迅速死亡而影響血液顏色發生明顯變化。記錄通氣時間和速度,觀察實驗小鼠一般狀況的變化,直至死亡,再記錄時間。

2.觀察記錄死亡小白鼠其尾巴、耳朵、口唇顏色的改變。

3.尸檢(方法同實驗第2項),并與其他實驗動物比較。

4.思考一下,如果發生煤氣,對中毒者進行早期搶救處理的原則應注意什么?

四、亞硝酸鈉中毒

1.取1只小白鼠,稱重,觀察其一般狀況。

2.皮下注射2%亞硝酸鈉,用量為0.35ml/10g體重,記錄時間。

3.觀察實驗小鼠一般狀況的改變,直至死亡,記錄時間。

4.尸檢(方法同實驗第2項),并與其他實驗動物比較。

5.思考一下,亞硝酸鈉中毒引起缺氧時,有哪些具有針對性的搶救治療措施?

五、氰化鉀中毒

1.取1只小白鼠,稱重,觀察其一般狀況。

2.腹腔注射0.04%氰化物,用量為0.2ml/10g體重,記錄時間。

3.觀察實驗小鼠一般狀況的改變,直至死亡,記錄時間。

4.尸檢(方法同實驗第2項),并與其他實驗動物比較。

注意氰化物有劇毒,勿沾染皮膚、粘膜,特別是有破損處。


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