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豚鼠的取血法及血清和血漿的制備方法

一、豚鼠的取血法

(1)足背中靜脈取血:助手固定動物,將其后肢膝關節伸直捉到實驗者面前,實驗者將動物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀的隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復取血時,兩后肢交替使用。

(2)心臟取血:豚鼠的心臟取血法與兔的采血方法相似。

二、血清和血漿的制備方法

血清和血漿均是不含細胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區別是血清不含凝血因子和血小板,血漿則含有凝血因子,它們的制備方法如下:

(1)血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置37℃環境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3000rpm,離心 5~10min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細胞成分),分裝備用。

(2)血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿。初用者最好將上清移至另一清潔容器,吸出血漿時用毛細吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細胞成分。

(3)富含血小板血漿制備:將獲得的血液經800rpm,離心5min,其上清即為富含血小板血漿。

常用血液抗凝劑
劑名

抗凝力

機理

應用

禁忌

10%草酸鉀 0.2ml抗凝10ml 的血 與Ca2+結合成不溶性草酸鈣而抗凝血 非蛋白氮二氧化碳結合力 血K+
血Ca2+
草酸鈉 1~2mg抗凝1ml的血 與Ca2+結合成不溶性草酸鈣而抗凝血 凝血酶原時間及復鈣時間測定 血K+
Ca2+
3.8%枸櫞酸鈉 6mg抗凝1 ml的血 與血中生成不溶性離子化的枸櫞酸鈣,阻止血液凝固 輸血、凝血象1:9血沉1:4  
雙草酸鹽(草酸鉀、草酸胺) 0.5ml抗凝5ml的血 保持紅細胞形態不變 RBC壓積測定  
草酸鉀3g、氟化鈉1g混合劑 4mg抗凝1ml的血 抑制葡萄糖分解而保持血糖濃度 血糖測定 BUN
(尿素氮)
肝素 0.1ml抗凝5~10ml的血;15±2.5IU(干粉)抗凝1ml血 抑制凝血酶原轉為凝血酶 血氨
血氣分析
3P試驗
EDTA-K2 1.5~2.2mg(干粉)抗凝1ml血 與Ca2+結合成不易電離的可溶性絡合物 血細胞計數 凝血象,血小板功能

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